登革病毒非结构蛋白1氨基端抗原性分析及其检测登革病毒感染动物血清

摘要

目的精确分析登革病毒(dengue virus,DENV)非结构蛋白1(non-structural protein1,NS1)氨基(N)端抗原性和免疫原性,探讨NS1N端多肽用于分型检测DENV感染可行性。方法合成4型DENV标准株NS1蛋白N端1-15氨基酸残基序列多肽(D-1P1、D-2P1、D-3P1和D-4P1),采用ELISA方法检测多肽同各型DENV NS1型特异性单抗和各型DENV分别免疫小鼠血清的反应性,竞争抑制法进一步验证单抗和阳性多肽反应特异性。分析4型DENV标准株NS1N端1-15氨基酸残基序列多肽在Pubmed中已报道的各型DENV分离株中的保守性。结果 6株DENV-1NS1型特异性单抗(5A48A3,5A65A2,5B29A1,5B71A8,5C29A3和5E68A17)特异性的同D-1P1反应;6株DENV-2NS1型特异性单抗(5D21A1、5E19A5、5A62A12、5A70A4、5E30A5和5E48A15)特异性的同D-2P1反应。D-1P1仅识别DENV免疫小鼠血清,其他多肽同各型DENV免疫小鼠血清反应无差异。DENV-1、2、3、4NS1N端保守性依次为98.96%、89.09%、83.58%和57.81%。结论 DENV-1NS1N端是DENV-1血清型特异性线性表位,该多肽可用于研制诊断DENV-1感染试剂盒;DENV-2NS1N端是DENV-2血清型特异性表位,以上研究有助于DENV亚单位疫苗和DENV感染分型诊断试剂盒的研制。