Shc1对M1型巨噬细胞极化的作用研究

摘要

目的 通过干扰小鼠巨噬细胞Shc1基因,探究Shc1对脂多糖LPS刺激巨噬细胞极化的作用。方法 分离C57BL/6J成年小鼠(6~8周)的巨噬细胞,加入LPS刺激24 h后,提取细胞RNA反转录为cDNA,利用siRNA技术敲低Shc1基因(si-Shc1),和对照组(Si-NC)同时处理48 h后检测Shc1的mRNA和蛋白的敲低水平,利用RT-qPCR分别检测促炎因子、转录因子和抑炎因子的mRNA水平变化;在Si-NC和si-Shc1组中使用脂多糖LPS刺激24 h后,利用RT-qPCR分别检测促炎因子、转录因子和抑炎因子的mRNA水平变化。结果 LPS刺激可以促进M1型巨噬细胞分泌促炎因子(P<0.000 1),且增强转录因子的RNA水平(P<0.000 1);与si-NC组相比,si-Shc1会增强细胞中促炎因子TNF-α的RNA水平(P<0.001),降低IL-1β、IL-6和iNOS的RNA水平(P<0.001);敲低Shc1的细胞加入LPS刺激后,促炎因子以及转录因子的RNA水平与未处理细胞组相当。结论 Shc1参与调控促炎因子的表达,但不参与脂多糖LPS对M1型巨噬细胞的极化作用。