肝郁气滞型急性胰腺炎病证结合大鼠模型建立的研究

摘要

针对肝郁气滞型急性胰腺炎(AP)的中医病因病机和临床证候表现,构建病证结合大鼠模型,为相关中药复方药效学研究与功效网络验证提供评价工具。依照AP中、西医诊疗指南和肝郁气滞型AP的中医病因病机和临床证候表现,综合临床疗效Meta分析结果,结合实验室前期建立的病证结合动物模型构建方法与评价策略,抽提适宜于肝郁气滞型AP大鼠动物模型评价的生物学替代指标;分别运用慢性不可预知刺激(chronic unpredictable stress,CUS)法、慢性不可预知刺激+L-精氨酸(CUS+L-Arg)法构建大鼠模型,用上述生物学替代指标评价肝郁气滞型AP病证结合大鼠模型成立与否。实验期间观察记录大鼠体质量、证候积分,实验结束时手术留取大鼠血清、脏器、组织,检测各指标。与正常组相比,CUS组、CUS+L-Arg组大鼠证候积分均显著增高(P<0.01);反证药物柴胡舒肝丸可明显降低2组模型大鼠证候积分(P<0.01),表明2种造模方法均能复制肝郁气滞型AP大鼠模型中的肝郁气滞证候。与正常组相比,CUS+L-Arg组大鼠血清淀粉酶(AMY)活力水平升高3倍,具有统计学意义(P<0.01),而CUS组大鼠AMY活力水平升高,但尚不到正常值的3倍;与正常组相比,CUS+L-Arg组大鼠胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)mRNA水平显著升高(P<0.01),CUS组大鼠胰腺组织TNF-αmRNA水平显著升高(P<0.05),IL-6 mRNA水平仅具有升高趋势,表明仅有CUS+L-Arg法能够复制病证结合模型中的胰腺损伤。该研究提示CUS+L-Arg法连续造模4周,可建立肝郁气滞型AP大鼠病证结合模型,且模型具有可重复性、成模后稳定、动物死亡率低、与临床发病机制相近的特点,可用于中药药效评价与功效网络验证。