增强型绿色荧光蛋白转基因小鼠脂肪间充质干细胞的多向分化潜能

摘要

目的分离、培养增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转基因小鼠脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs),并研究ADMSC在体外定向诱导下的多向分化潜能。方法分离EGFP转基因小鼠腹股沟的皮下脂肪组织,剪碎后胶原酶消化,含10%优等胎牛血清(fetal calf serum,FBS)的α-MEM培养液培养,取第3代EGFP-ADMSCs进行成骨、成脂诱导,并分别采用茜素红钙盐染色和油红O染色进行鉴定。结果成功获得了稳定表达EGFP的ADMSC;EGFP-ADMSCs经成骨诱导21 d后茜素红染色可见橘红色钙盐沉积,经成脂诱导14 d后油红O染色阳性,并且分化后细胞的EGFP表达不受影响。结论 EGFP转基因小鼠来源的脂肪间充质干细胞具有普通小鼠ADMSCs相同的自我更新增殖和多向分化的干细胞特性,并且能稳定表达EGFP,可以成为研究干细胞修复受损组织的作用机制的有效示踪工具。