MTT法检测卵蛋白刺激哮喘小鼠脾淋巴细胞增殖最佳实验条件的研究

摘要

目的探讨MTT法检测卵蛋白（OVA）刺激哮喘小鼠脾淋巴细胞增殖的最佳实验条件。方法制备OVA诱导哮喘小鼠模型,分离脾淋巴细胞。接种不同浓度的脾淋巴细胞,在不同培养时间点测定吸光度（A）值,确定最佳细胞浓度和检测时间。观察不同浓度OVA对脾淋巴细胞增殖的影响。结果最佳脾淋巴细胞接种浓度为2×10^6~4×10^6cells/ml,最佳检测时间为48 h。培养24和48 h时,细胞浓度为1×10^6~4×10^6cells/ml,A值与细胞浓度呈线性关系（r〉0.99）。10μg/ml OVA可诱导脾淋巴细胞显著增殖,100μg/ml OVA反而抑制脾淋巴细胞增殖。结论 MTT法可用于检测哮喘小鼠的脾淋巴细胞增殖,细胞浓度与A值呈线性关系。OVA浓度是影响脾淋巴细胞增殖的重要因素。