MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究

摘要

目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件.方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定三种试剂的最佳实验波长.根据细胞浓度与OD值关系曲线确定三种试剂各自的最适细胞浓度.取最适浓度的B16细胞分别加入三种试剂在0.5h、1h、2h和4h四个不同时间点测定吸收值,根据OD值确定最佳的检测时间.结果:MTT、MTS法的最佳波长为492nm,WST-1法为450nm.MTT的最适细胞接种浓度为1.6×103-2.56×104/mL,MTS的最适细胞接种浓度为5×10-6.4×103/mL,WST-1的最适细胞接种浓度为2.5×10-1.6×103/mL.三种方法的最佳测定时间均为4h.结论:MTT、MTS、WST-1分别适用于不同条件下检测细胞的存活与增殖,可为抗病毒及抗癌药物的筛选提供实验依据.