miR⁃30a⁃5p靶向与调控SNAIL1抑制人胃癌细胞BGC⁃823的迁移

摘要

已有研究表明,miR-30a-5p在胃癌中发挥抑癌基因的作用,抑制胃癌细胞的增殖与侵袭,但其抑制胃癌发生发展的机制尚不清楚。本文研究miR-30a-5p如何靶向调控SNAIL 1,进而影响人胃癌细胞BGC-823的迁移。通过qRT-PCR检测和TCGA数据库分析发现,miR-30a-5p的表达水平在胃癌组织与胃癌细胞BGC-823中均降低。利用划痕实验和Transwell实验检测发现,在BGC-823细胞中转染miR-30a-5p mimics过表达miR-30a-5p后细胞迁移和侵袭明显被抑制,而转染miR-30a-5p inhibitor降低miR-30a-5p表达水平时细胞迁移和侵袭能力提高。qRT-PCR和Western印迹及免疫荧光检测发现,过表达miR-30a-5p细胞中波形蛋白(vimentin)和N-钙黏着蛋白(N-cadherin)的mRNA及蛋白质表达水平降低,而E-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达水平升高。在miR-30a-5p inhibitor组中结果恰恰相反。通过生物信息学预测、双荧光素酶基因报告、Western印迹及免疫荧光验证SNAIL 1是miR-30a-5p作用的靶基因。在过表达miR-30a-5p的BGC-823细胞中进一步过表达SNAIL 1,可以逆转miR-30a-5p的作用。该研究表明,miR-30a-5p可通过负调控靶基因SNAIL 1的表达,进而抑制BGC-823胃癌细胞的迁移。本研究将为miR-30a-5p在胃癌发生发展中的作用机制提供理论依据,并有望为胃癌治疗提供新靶点和生物标志物。