人精浆中弱精子症相关蛋白质的“shotgun”鉴定

摘要

目的:利用"shotgun(鸟枪)"蛋白质组学策略鉴定精浆中弱精子症相关的蛋白质。方法:正常健康已生育和弱精子症男性各3例自愿捐献的精液标本,通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,抽提肽段后利用"shotgun"蛋白组学策略鉴定蛋白质。然后,将两组鉴定到的唯一肽段数≥2和唯一肽段数=1但肽段总数≥4的蛋白质对比分析。结果:正常生育男性和弱精子症男性精浆中共得到172种差异蛋白质,全部是有和无的关系。其中89种蛋白质存在于弱精子症患者,而正常生育者没有鉴定到;83种蛋白质存在于正常可生育者,而弱精子症患者没有鉴定到。这些差异蛋白质集中在信号转导和酶催化活性类。结论:通过分析差异蛋白质的功能,有10种蛋白质尤其重要,可能与弱精子症相关,这10种蛋白质为:膜联蛋白VI同工型2、白介素6受体β亚单位同工型1前体、相对分子质量为400000的蛋白质、胞质动力蛋白重链、α-辅肌动蛋白4、受体型酪氨酸蛋白磷酸酶η前体、维生素D结合蛋白前体、蛋白S100-A11、蛋白S100-A9和膜联蛋白A4。