基于JNK/p38 MAPK信号通路探究龙盘止咳方对甲型流感病毒肺炎大鼠肺组织损伤的影响

摘要

目的探讨龙盘止咳方对甲型流感病毒(IV)肺炎大鼠肺组织损伤的影响及其对C-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的调节作用。方法将120只SPF级Wistar大鼠按照随机数字表法分为6组,分别为正常对照组、空白模型组、龙盘止咳方低剂量组(简称低剂量组)、龙盘止咳方中剂量组(简称中剂量组)、龙盘止咳方高剂量组(简称高剂量组)和奥司他韦阳性对照组(简称阳性对照组),每组20只。除正常对照组外,其余5组大鼠适应性饲养1周后建立甲型IV感染大鼠模型,造模后第1天开始灌胃给药,均每日1次,共5 d。在6组中分别随机选取大鼠10只,每天观察大鼠的体质量、生存状态、临床症状和疾病体征,并评价其生存情况,包括存活率和存活时间,自给药前1天开始观察,连续观察15 d。每组剩余的10只大鼠给药5 d后处死并采集样本,测量体质量和肺湿重,并计算肺指数,检测肺组织病理变化、病毒载量、炎症细胞因子、血栓素A2(TXA2)、前列腺素E2(PGE2)、JNK、p38 MAPK mRNA水平及p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK值。结果正常对照组大鼠在研究期间无临床症状或死亡,体质量逐日增加。空白模型组大鼠第3天开始体质量明显下降,平均存活时间最短,且均在15 d内死亡,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量组和阳性对照组大鼠的体质量、平均存活时间和存活率均高于空白模型组(P<0.05),其中高剂量组大鼠体质量最高(P<0.05)。感染后第6天,正常对照组大鼠未见组织学改变;与正常对照组比较,空白模型组组织病理评分、肺指数和肺内IV的相对定量,肺匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和干扰素-γ(IFN-γ)、TXA2、PGE2、JNK、p38 MAPK mRNA水平及p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK值均显著增高(P<0.05);低、中、高剂量组和阳性对照组的上述指标均显著降低(P<0.05),其中高剂量组降低最显著(P<0.05)。结论龙盘止咳方能明显减轻甲型IV感染大鼠的临床症状,增加体质量,延长存活时间,显著缓解肺部病变,提高存活率。龙盘止咳方可能通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路阻断甲型IV感染大鼠体内细胞因子的产生并抑制病毒性肺炎的进展。