真核双基因表达载体pIRES-IL-24-ES的构建与鉴定

摘要

目的构建白介素24(IL-24)与内皮抑素(ES)的真核双基因表达载体,检测它们在体外的表达。方法从外周血和人胎肝组织中经RT-PCR分别扩增IL-24与EScDNA序列,并将其定向克隆至真核双基因表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-IL-24-ES,经酶切及测序鉴定后,转染NIH3T3成纤维细胞。经RT-PCR及ELISA法检测IL-24和ES在NIH3T3中的表达。结果重组真核双基因表达载体pIRES-IL-24-ES构建成功,IL-24与ES可在NIH3T3细胞中有效表达。结论真核双基因表达载体pIRES-IL-24-ES成功构建为研究肿瘤的基因治疗提供了一定线索。