P19细胞分化过程中激活型bHLH基因的表达

摘要

目的检测P19细胞分化过程中激活型碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录调控因子mRNA的表达,探讨其神经分化机制。方法用维甲酸(RA)诱导P19细胞分化,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测P19分化前以及分化后2、4d时果蝇As-c的哺乳动物类似物(Mash-1)、果蝇atonal的哺乳动物类似物(Math-1)、Neurological stem celll eukemia-2(Nscl-2)mRNA的表达。采用免疫印迹方法(Western blot)检测Mash-1蛋白的表达。结果Mash-1mRNA和Nscl-2mRNA随分化表达升高,在分化后2d到达顶峰后下降,Math-1mRNA在分化后期表达明显。Mash-1蛋白的表达与mRNA的表达一致。结论P19细胞分化过程中bHLH转录因子mRNA的表达具有明显的时相性,为解释神经细胞分化调控机制提供实验基础。