整合素β1和细胞外基质对人胶质瘤细胞U251细胞骨架的作用

摘要

目的研究整合素β1和细胞外基质[主要选取层黏连蛋白(laminin,LN)和纤黏连蛋白(fibronectin,FN)多形性胶质母细胞瘤U251细胞(U251MG)]对细胞微丝和中间丝(胶质纤维酸性蛋白glial fibrillary acidic protein,GFAP)骨架的影响。方法体外整合素β1抗体和细胞外基质处理U251MG细胞系,通过免疫荧光细胞化学染色及激光共聚焦显微镜,观察并分析细胞微丝和GFAP细胞骨架在细胞中定位的变化;通过运动迁移实验分析其对细胞运动能力的影响。结果 FN、LN包被处理的U251MG细胞内可见粗壮而密集、清晰的微丝结构。抗整合素β1抗体处理的细胞内,微丝分布杂乱而模糊,并可见大量絮团状的F-actin小体。抗整合素β1抗体处理的细胞内GFAP染色荧光信号减弱,FN和LN对GFAP表达及结构无影响。微丝和GFAP双标均阳性重合处位于F-actin小体处。抗整合素β1抗体减弱U251MG细胞在FN和LN的运动、迁移能力(P<0.05)。结论在U251MG细胞中,通过整合素β1和FN、LN相互作用,可改变细胞微丝的分布,并以此影响胶质瘤细胞的运动和迁移。GFAP在U251MG细胞内的分布同F-actin小体有关。