p,p’-DDE对大鼠睾丸支持细胞细胞外信号调节激酶转导通路影响的机制研究

摘要

目的研究p,p’-DDE对离体培养大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell)内的细胞外信号调节激酶(ERK)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路影响机制。方法从大鼠睾丸组织中分离支持细胞进行离体原代培养,分别以0、10、30、50μmol/L的p,p’-DDE染毒,用MTT比色法、SABC法和Western blotting法来检测细胞活性以及p-ERK的表达情况。结果在MTT试验中,支持细胞活性随着p,p’-DDE剂量的增高而逐渐降低;在免疫组化试验中,细胞内p-ERK随p,p’-DDE剂量的增高而染色加深;同时,在western blotting实验中50μmol/L p,p’-DDE染毒组支持细胞内p-ERK在染毒后12、24 h较染毒前表达上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p,p’-DDE导致支持细胞细胞活性降低;同时激活细胞内ERK磷酸化,并且随着作用时间的增加,ERK的磷酸化表达于12、24 h时明显增加,这预示着ERK磷酸化可能参与信号通路的传导,可能会影响下游通路进而影响到基因的转录和表达。