免疫亲和柱净化-反相高效液相色谱法检测乳与乳制品中黄曲霉毒素M1

摘要

目的建立免疫亲和柱净化-反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定乳和乳制品中的黄曲霉毒素M1的方法。方法乳及乳制品中黄曲霉毒素M1经包被特异性M1抗体的免疫亲和柱净化后,采用反相C18高效液相色谱柱进行分离,以乙腈-水（15∶85）为流动相,采用等度法洗脱,荧光检测器检测,激发波长365 nm,发射波长435 nm。结果乳及乳制品中的黄曲霉毒素M1在C18高效液相色谱柱上得到很好的分离,保留时间为6.482 min。方法的检出限0.005,定量限0.015μg/kg,相对标准偏差为3.3%-4.6%,平均回收率为80.1%-88.9%之间,相关系数r〉0.9999。结论采用包被特异性M1抗体的免疫亲和柱净化乳及乳制品中的黄曲霉毒素M1,可以有效的去除样本中杂质的干扰,提高了黄曲霉毒素M1检测的灵敏度及准确度,该法适合乳与乳制品中黄曲霉毒素M1测定。