棘白菌素B高产菌株Aspergillus delacroxii转化体系的构建与优化

摘要

Aspergillus delacroxii SIPI-W15是棘白菌素B的高产菌株,目前尚缺少相关遗传操作信息,极大地限制了其代谢机制和分子机制的研究。本研究考察了Asp. delacroxii SIPI-W15 转化过程中的主要影响因素,建立了高效的遗传转化体系: Agrobacterium tumefaciens AGL-1作为介导菌株、新鲜孢子浓度1×10^6cuf/ml、农杆菌浓度OD600 0.7、24 ℃共转化3d。在最佳转化体系下,转化效率可达96个转化子(以10^6个分生孢子计),外源基因可以稳定遗传。基于上述遗传转化技术,获得棘白菌素B产量提高22%的转化子(产量达到2468mg/L),为进一步研究棘白菌素B 生物合成的功能基因和提高其产量提供了有力手段。