不同提取及扩增方法检测新型冠状病毒核酸的性能比较分析

摘要

目的对磁珠法和释放剂法2种核酸提取方法及扩增时长不同的2种荧光PCR试剂盒检测新型冠状病毒的性能进行比较,为医疗机构对新冠核酸检测试剂盒以及核酸提取方法的选择提供参考依据。方法将定值质控品稀释成1000、500、250、125、62.5和31.25 copies/mL 6个不同梯度浓度,根据不同的提取方法与扩增试剂将实验分为3组:第1组为磁珠法提取试剂+普检试剂(提取+普检),第2组为磁珠法提取试剂+快检试剂(提取+快检),第3组为释放剂+快检试剂(释放+快检)。根据结果比较分析各组检测方案在不同浓度下的批内重复性和灵敏度。每组实验均设置空白、阴、阳对照,在对照结果成立的前提下进行结果判读。结果模板浓度≥500 copies/mL时,3种组合双基因检出率均能达到100%;在模板浓度为250 copies/mL及以下时,释放+快检组出现漏检;在模板浓度为62.5 copies/mL及以下时,提取+快检组出现漏检;在模板浓度为31.25 copies/mL时,提取+快检组出现漏检。磁珠法提取试剂+普检试剂组合灵敏度及批内重复性最好;释放剂+快检试剂组合用时较磁珠法提取试剂+普检试剂组合少约100 min。结论磁珠法提取试剂+普检试剂组合灵敏度最高,释放剂+快检试剂组合用时最少,检验的组合应结合检测对象的流行病学暴露史及临床表现合理选择方案。