白藜芦醇对人精子冷冻损伤的保护作用

摘要

目的:通过在人精子冷冻保护液中添加白藜芦醇,研究其对冻融后精子质量和功能的影响。方法:选择正常精液与少弱精子症样本各50例,液化后的精液样本分别与甘油-卵黄-柠檬酸盐(GEYC)冷冻保护液或含有30μmol/L白藜芦醇的GEYC冷冻保护液混匀。冷冻复苏前后,进行精子活力、存活率及顶体反应分析。采用丙二醛(MDA)及活性氧(ROS)检测试剂盒评估精子脂质过氧化程度及ROS水平。通过罗丹明123(Rh123)染色法及TUNEL试验检测精子线粒体膜电位及DNA损伤。结果:在正常精液和少弱精子症样本组中,与各组冷冻前新鲜精液相比,冻融后前向运动精子百分率、总活力、存活率、线粒体膜电位及顶体反应率均显著下降(P<0.05),而精子ROS、MDA水平和DNA碎片指数(DFI)均显著升高(P<0.05)。冷冻保护液中添加30μmol/L白藜芦醇后,正常精液组前向运动精子百分率[(43.1±6.3)%]、总活力[(56.9±7.4)%]、存活率[(67.5±5.6)%]、线粒体膜电位[(63.4±7.5)%]及顶体反应百分率[(26.3±4.7)%]较冷冻对照(未加白藜芦醇)的前向运动精子百分率[(32.7±4.8)%]、总活力[(44.8±6.9)%]、存活率[(52.3±6.1)%]、线粒体膜电位[(56.5±7.0)%]及顶体反应百分率[(16.6±3.8)%]均显著提高(P<0.05),而精子ROS、MDA水平和DFI较冷冻对照均显著降低(P<0.05)。在少弱精子症组中,添加白藜芦醇也均显著地提高了冷冻后精子前向运动百分率、总活力百分率、存活率、线粒体膜电位及顶体反应百分率,尤其是DFI[28.5±4.8)%]较冷冻对照[(36.3±5.7)%]显著降低(P<0.01)。结论:在精液冷冻保护液中添加白藜芦醇可以通过降低精子内ROS水平减少精子冷冻损伤,从而改善解冻后精子质量和功能。