基于ITS2序列鉴定甘遂种子

摘要

为了对多形态甘遂种子的真实性进行鉴定,对收集到的3个省区共11份甘遂种子进行形态学观察,通过ITS2序列测序分析,并借助于中药材DNA条形码鉴定系统和NCBI数据库进行BLAST鉴定,应用MEGA 7软件计算遗传距离值、构建系统发育树,比较二级结构差异,并将结果进行田间试验验证。结果表明,ITS2序列测序分析共得到2条不同序列,2条序列存在明显的亲缘距离,GS序列Ⅰ与甘遂药材的ITS2序列相吻合,而GS序列Ⅱ与大戟属序列相近,其中GS序列Ⅰ对应种子批次均可发育成符合《中国药典》描述的呈椭圆形、长圆柱形或连珠形;此外在种子形态、田间生长势、植株形态等特征上2条序列对应种子也表现出明显的差异。由此表明基于ITS2序列分析的分子鉴定技术可以有效鉴定多形态甘遂种子的真实性,并明确了正品甘遂种子的形态特征,为甘遂种子生产、流通及种植提供理论依据和鉴定手段。