体外培养制备促甲状腺激素单抗及应用

摘要

目的探讨应用体外培养法代替传统的体内法小鼠腹水制备单克隆抗体,制备促甲状腺激素检测试剂盒。方法应用中空纤维系统体外培养杂交瘤细胞制备单克隆抗体,制备甲状腺激素检测试剂盒,检测其效价、灵敏度、特异性。500份临床体检血清进行临床符合率检测,并与应用体内制备单克隆抗体在产试剂盒进行各项性能指标比较。结果中空纤维培养TSH杂交瘤细胞株其抗体分泌量达到1.5 mg/ml,纯度90%以上。采用同一批次辅料,酶结合物效价由体内法1/3 000提升到体外法1/4 000,建立检测方法的灵敏度为0.005μIU/ml^0.011μIU/ml,非特异性干扰低于0.05μIU/ml,剂量-反应曲线r2≥0.990,与罗氏和体内法在产试剂盒进行临床符合率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外培养制备单克隆抗体可以代替小鼠腹水制备单克隆抗体,用于TSH体外诊断检测,具有重要的应用价值。