肾脏局部肾素血管紧张素系统激活在载脂蛋白E基因敲除小鼠脂质肾损伤中的作用

摘要

目的探讨肾脏局部肾素血管紧张素系统(RAS)激活在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠高脂介导的肾损伤中的作用。方法将16只8周龄雄性ApoE-/-小鼠适应性喂养1周后随机分为高脂饮食组(n=8)和普通饮食对照组(n=8),8周后处死小鼠收集血浆标本及肾脏组织标本,放射免疫法检测血浆前肾素、肾素、血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,临床生化试剂盒检测血浆脂质谱,HE和Masson染色评估肾脏炎症细胞浸润及胞外基质堆积,免疫组化及Westernblot法检测肾脏组织内RAS成分、上皮细胞间充质转分化(EMT)标记蛋白E钙黏蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,并评估高血脂症、肾脏局部RAS水平与肾脏损伤的相关性。结果与对照组比较,高脂饮食组小鼠血脂水平明显升高[三酰甘油(7.5±2.0)比(3.1±0.6)mmol/L;总胆固醇(27.8±4.0)比(13.7±2.7)mol/L;低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(11.6±3.0)比(5.8±1.5)mmol/L,均P<0.05],伴有肾小管间质胞外基质堆积增多。血浆肾素、AngⅠ及AngⅡ水平两组间差异无统计学意义,但高脂饮食组血浆前肾素水平明显低于对照组[(1108.6±55.2)比(1881.3±180.4)μg/(L·h),P<0.05]。免疫组化及Westernblot检测均示肾脏局部RAS成分表达升高。局部AngⅡ水平与血浆总胆固醇、三酰甘油和LDL-C水平呈正相关(分别r=0.709、0.758、0.806,均P<0.05),血管紧张素原、AngⅡ、肾素、AngⅡ1型受体(AT1R)和AngⅡ2型受体(AT2R)水平与E-cadherin表达呈负相关(分别r=-0.723、-0.772、-0.754、-0.821、-0.851,均P<0.05),并与α-SMA呈正相关(分别r=0.636、0.842、0.600、0.842、0.770,均P<0.05)。结论高血脂症可诱导EMT、肾小管间质纤维化和促进肾损伤进展,并与肾脏局部RAS激活有关。