野艾蒿花粉变应原Art la 3.0101和Art la 3.0102重组表达与血清IgE反应性特征分析

摘要

目的:筛查变应原并明确蒿属植物种属鉴定,深入分析野艾蒿变应原的免疫活性。方法:进行问卷调查及血清特异性IgE(sIgE)检测筛查变应原;采集蒿属样本及内转录间隔区(ITS)序列鉴别物种;构建野艾蒿变应原毕赤酵母蛋白表达载体,转化宿主重组表达和纯化,结果经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和western blotting检测分析。结果:376例受试者血清sIgE检测总阳性率为58.78%,其中艾蒿阳性率高达48.67%。ITS序列物种鉴定发现样本与野艾蒿Artemisia lavandulifolia(KX421740)相似性为99.74%;野艾蒿花粉变应原基因Art la 3毕赤酵母分泌表达载体pPICZαA-Art la 3.0101和pPICZαA-Art la 3.0102的片段大小分别为798 bp和795 bp。Western blotting检测结果显示重组变应原Art la 3.0102与16例艾蒿过敏患者血清的IgE结合,阳性率为26.7%(16/60),该16例受试者临床症状较重且艾蒿sIgE等级高。结论:野艾蒿是内蒙古及甘肃地区主要致敏源之一,其重组变应原Art la 3.0102具有IgE结合活性,可作为致敏源筛查的候选抗原,并推测对变应原Art la 3.0102过敏可能作为野艾蒿诱发变应性疾病的病情严重程度指标。