miR-135b对结肠癌细胞凋亡诱导作用及机制

摘要

目的探讨miR-135b对HCT116结肠癌细胞凋亡的诱导作用及机制。方法HCT116细胞分为对照组、miR-135b NC组及miR-135b inhibitor组,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Hoechst检测细胞凋亡,Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)、多聚ADP核糖多聚酶(cleaved-PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-caspase 3)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶A(AKT)表达。结果与对照组(1.00±0.03)及miR-135b NC组(1.02±0.04)比较,miR-135b inhibitor组细胞中miR-135b表达(0.53±0.05)显著下调(F=259.19,P<0.05)。对照组、miR-135b NC组、miR-135b inhibitor组HCT116细胞活力和细胞凋亡率分别为(0.58±0.05)、(0.59±0.06)、(0.39±0.04)和(3.24±0.13)%、(3.27±0.08)%、(36.48±0.52)%,与对照组、miR-135b NC组比较,miR-135b inhibitor组HCT116细胞活力明显下降(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05)。与对照组、miR-135b NC组比较,miR-135b inhibitor组HCT116细胞Bcl-2、cleaved-caspsase 3、PI3K及p-AKT蛋白表达下调(P<0.05),Bax、cleaved-PARP及PTEN蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论下调miR-135b可诱导HCT116细胞凋亡,其机制可能与阻断PTEN/PI3K/AKT信号通路有关。