三甲胺与甲萘醌联用对VSMCs增殖及HUVECs内胆固醇含量的影响

摘要

目的探究三甲胺(trimethylamine,TMA)与甲萘醌单独用药及联合用药对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的增殖、迁移能力及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)内胆固醇含量的影响。方法首先采用MTT法检测不同浓度TMA对VSMC及HUVEC增殖的影响;划痕实验和Transwell检测TMA与甲萘醌单独用药及联合用药对VSMC迁移能力的影响;DCFH-DA荧光探针法检测VSMC内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot法检测VSMC中MMP9、PCNA、SM22α的蛋白水平;ELISA法检测HUVEC内总胆固醇(cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量。结果不同浓度的TMA对VSMC及HUVEC的生长并无明显的影响。与单独用药相比,TMA与低剂量的甲萘醌联合用药可明显促进VSMC迁移与增殖,提高胞内ROS水平,上调VSMC内MMP9及增殖型标志基因PCNA的蛋白表达,同时下调VSMC内分化型标志基因SM22α的蛋白表达。与TMA和低剂量的甲萘醌联合用药组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)、TMA和甲萘醌联合处理组可明显降低VSMC内ROS水平,下调VSMC内MMP9及PCNA的蛋白表达,上调VSMC内SM22α的蛋白表达。TMA与低剂量的甲萘醌联合用药还可以明显提高HUVEC内TC、HDL-C及LDL-C的含量。结论TMA自身对于VSMC和HUVEC并无显著影响,加入甲萘醌后,联合用药会诱导VSMC表型转化,提高HUVEC内胆固醇含量。同时NAC可缓解TMA与低剂量甲萘醌联合用药对VSMC造成的影响。提示联合用药可能通过影响ROS水平增加动脉粥样硬化发生的风险。