依帕司他抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激的分子机制

摘要

目的探究依帕司他对高糖诱导的肾小球系膜细胞抑制氧化应激的分子机制。方法将106个肾小球系膜细胞转移至培养瓶中,分为正常生理浓度葡萄糖(5.5 mmol·L-1)组、高浓度葡萄糖(30 mmol·L-1)组、依帕司他高剂量浓度组(10μmol·L-1)、依帕司他中剂量浓度组(1μmol·L-1)、依帕司他低剂量浓度组(0.1μmol·L-1),在37℃,体积分数5%CO2培养箱内于无血清培养基培养48 h。分别测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,T-SOD)、铜锌-超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、一氧化氮(NO)含量。采用western-blot方法分别测定肾小球系膜细胞内硝化酪氨酸蛋白(NT)来反映肾小球细胞内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)的生成量。结果与高浓度葡萄糖组对比,依帕司他各剂量组中的肾小球系膜细胞内ROS含量显著地降低;系膜细胞中T-SOD和Cu/Zn-SOD含量显著升高;系膜细胞中GSH的含量无显著变化。与高浓度葡萄糖组相比,依帕司他各剂量组的系膜细胞中NO含量显著地升高;高剂量(10μmol·L-1)和中剂量(1μmol·L-1)的依帕司他能够显著地降低NT的蛋白表达,表明ONOO-的生成被显著抑制。结论依帕司他能够升高由高糖诱导的肾小球系膜细胞中T-SOD和Cu/Zn-SOD含量,增强其对ROS的清除能力,降低由高糖诱导的系膜细胞中ROS含量。依帕司他虽能够升高NO生成,但仍能抑制高糖培养的系膜细胞中NT蛋白表达,抑制ONOO-生成。