利用肾系膜细胞3D培养体系探讨高糖环境下miR-382与肾纤维化的相关性

摘要

目的采用LBL技术构建肾系膜细胞3D细胞球,研究miR-382在糖尿病肾病系膜病变及肾纤维化中的作用。方法采用LBL技术构建肾系膜细胞3D细胞球,研究不同葡萄糖浓度对肾系膜细胞的影响及miR-382在其中的作用。实验组分为3组(葡萄糖浓度分别设为5.6 mmol/L、25 mmol/L、40mmol/L),采用qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光等手段检测各组细胞中转化生长因子(TGF-β1)、纤连蛋白(Fn)的表达,miR-382及其可能的靶基因第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)的水平。结果高糖可使系膜细胞miR-382表达上调,分泌PTEN减少,TGF-β1、Fn表达显著增加。结论miR-382可能通过负向调控PTEN的表达,参与糖尿病肾病早期系膜病变及肾纤维化过程。