猫爪草醇类提取物对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的影响

摘要

目的探讨猫爪草(RTR)醇类提取物对于小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)极化的影响。方法提取6~8周BALB/c雌鼠骨髓细胞,用DMEM完全培养基(含有20 ng/mL GM-CSF)培养7 d诱导为BMDM。用CCK8摸索RTR刺激巨噬细胞的最适浓度,并观察巨噬细胞的形态变化。ELISA检测细胞培养液中iNOS、TGF-β、TNF-α、IL-10的变化;qRT-PCR检测细胞内的IL-6、TNF-α、iNOS、TGF-β、IL-10、Arg-1的表达;FCM检测细胞表面标志物NOS2和CD206的表达。结果RTR刺激BMDM的最佳浓度为100μg/mL,刺激24 h后呈梭形改变。RTR处理组与对照组相比,TNF-α和iNOS分泌水平升高,TNF-α、iNOS和IL-6的mRNA表达水平升高(P<0.05);TGF-β和IL-10分泌水平降低,TGF-β、IL-10和Arg-1的mRNA表达水平降低(P<0.05);刺激36 h后,巨噬细胞表面高表达NOS2,CD206低表达(P<0.05)。结论猫爪草醇类提取物可刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞产生M1型极化。