紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及降糖作用研究

摘要

目的：探讨紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及降糖作用。方法通过分离提纯得到紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂，后建立四氧嘧啶糖尿病动物模型，取雄性昆明种小鼠15例，随机分为正常组、四氧嘧啶糖尿病模型组与胰蛋白酶抑制剂组，各5例。四氧嘧啶糖尿病模型组小鼠腹腔注射四氧嘧啶后予以紫花芸豆胰蛋白酶抑制，胰蛋白酶抑制剂组小鼠予以紫花芸豆胰蛋白酶抑制，正常组小鼠注射0.9%氯化钠溶液。观察3组小鼠的血糖变化情况。结果当pH值为4.5和7.5时，紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂的提取率高，75℃下紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂的活性回收率和纯化倍数最高，pH=8，馏分比例30%~60%时的活性强，又因收集的样品应为酸性蛋白，故后续纯化过程中考虑加硫酸铵饱和30%后，继续加至60%，收集此时沉淀进行溶解透析为下一步离子交换所用；紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂可降低四氧嘧啶诱导的血糖升高，同时降低总胆固醇（ TC），但对高密度脂蛋白胆固醇（ HDL-C）和三酰甘油（ TG）的效果不明显。结论紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂治疗糖尿病有一定的临床效果。