大片吸虫成虫cDNA表达文库的构建及其表达序列标签初步分析

摘要

为发现潜在的抗大片吸虫病的候选疫苗分子,控制大片形吸虫病,本研究以大片吸虫成虫为材料,应用SMARTTcDNA文库构建技术,构建了以表达载体λTriplEx2为基础的大片吸虫成虫cDNA表达文库.经测定,库容量为1.08×106 PFU/ml,重组率为96.6%,扩增后的文库滴度为2.41×109 PFU/ml,插入片段平均大小约为1 000 bp;经大肠杆菌BM25.8质粒化后,从文库中随机挑选40个重组克隆测序,获得32条有效ESTs;经BLASTX和BLASTn程序检索和分析,发现有9条ESTs代表已知基因,16条ESTs相似性较低或无匹配,列为新基因.9条已知基因代表了半胱氨酸蛋白酶、卵壳蛋白、钙连接蛋白等三类功能蛋白,其余新基因也暗示与信号传导、蛋白合成、免疫刺激等基因相关,具有潜在的研究价值