肝癌患者与健康人外周血Vγ 9Vδ 2T细胞扩增前后比例及分化亚型对比

摘要

目的 探讨肝细胞癌(HCC)患者外周血的Vγ9Vδ2T细胞比例,成熟分化亚型与健康人的差别,经体外扩增后上述指标的变化.方法 选取健康捐献者(n=10)和HCC患者(n=20)的外周血共10 mL,采用不连续密度梯度离心法分离单核细胞层,借助流式细胞术检测Vγ9Vδ2T细胞占总T细胞比例,成熟分化亚型,并在体外加入唑来膦酸和IL-2进行扩增培养,12～14d后收集细胞再次检测上述指标.结果 培养前HCC组患者外周血中Vγ9Vδ2T细胞占总T细胞比例的平均值比健康人低(P＜0.05,P=0.009),在经过体外扩增培养后其比例明显升高(P＜0.0001),而在体外扩增后患者与健康人的Vγ9Vδ2T细胞比例差异无统计学意义(P＞0.05,P=0.3408).患者Vγ9Vδ2T细胞的分化与成熟亚型作体外培养的前后对比发现,培养后Tn、Tcm、Temra的比例较培养前有明显下降(P＜0.05,P=0.0045,P=0.0236,P=0.0162);患者和健康人Tem比值均较培养前明显升高(P＜0.0001);而在扩增前、扩增后患者和健康人的Vγ9Vδ2T细胞的成熟分化比例差异均无统计学意义.结论 肝癌患者外周血Vγ9Vδ2T细胞比例虽然低于健康人,但其分化成熟亚型的分布比例与健康人相似,且经过体外扩增培养后Vγ9Vδ2T细胞和总效应细胞比例,均与健康人无差异.其增殖功能得到恢复,肝癌患者和健康人中应用这种体外扩增方法外周血Vγ9Vδ2T细胞的效果相似.