Bcl-2、Bax、Bcl-2α导致凋亡双向调节作用在肝癌中的意义

摘要

@@为了解凋亡调节基因Bcl-2、Bax和Bcl-2α在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其双向调节作用，现应用免疫组化SP法,对57例肝细胞癌组织中Bcl-2、Bax、Bcl-2α的表达进行了观察和分析。rn1 材料和方法rn1.1 材料选用外科手术切除及肝活检诊断为肝细胞癌标本57例，经10%甲醛固定、石蜡包埋、5μm连续切片，分别做HE和免疫组化染色。鼠抗Bcl-2单克隆抗体及鼠抗Bax单克隆抗体均为Santa Cruz公司产品(购自北京中山生物技术有限公司)，抗体稀释度为1∶200和1∶100；鼠抗Bcl-2α(Ab-1)单克隆抗体为Maxim公司产品(购自福州迈新生物技术有限公司)，抗体稀释度为1∶50；SP试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。rn1.2 方法免疫组化染色采用SP法，抗原热修复用微波修复15分钟，4℃过夜，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封固。PBS代替-抗设阴性对照，阳性对照为扁桃体组织。rn 结果判定标准：阳性细胞为胞浆或胞膜棕黄色染色，阳性表达程度分三级：低倍镜野阳性细胞少于1/3为(＋)、1/3～2/3为(＋＋)、大于2/3为(＋＋＋)。rn1.3 统计学处理系四格表及配对资料χ2检验。rn2 结果rn2.1 光镜所见 57例HCC中，40例癌组织光镜下为梁状和窦隙状结构，9例癌组织内见假腺样和腺泡状结构，15例癌组织部分或大部分区域呈透明细胞癌，2例癌组织周围见大量坏死。组织学分级，在57例HCC中，高分化者22例(38.6%)，中分化者18例(31.6%),低分化者17例(29.8%)。rn2.2 免疫组化结果 Bcl-2、Bax主要定位于胞浆部分呈粗大颗粒状分布，阳性标本表达强度不尽相同。Bcl-2α定位于胞膜，部分胞浆表达，且表达程度以(＋)～(＋＋)为主。57例HCC癌组织中，Bcl-2、Bcl-2α和Bax的表达阳性率分别为40.4%(23/57)、17.5%(10/23)和89.5%(51/57)。其中高分化组中的阳性率分别为50.0%(11/22)、13.6%(3/22)和86.4%(19/22)；中分化组中的阳性率分别为44.4%(8/18)、16.7%(3/18)、94.4%(17/18)；低分化组中的阳性率分别为23.5%(4/17)、23.5%(4/17)和88.2%(15/17)。Bcl-2、Bax、Bcl-2α在不同分化程度的HCC中，表达阳性例数无显著差异(见表1)。