反胶束中中性蛋白酶AS1.398反应机理

摘要

枯草杆菌中性蛋白酶AS1.398可用于反胶束萃取全脂豆粉分离大豆蛋白和油脂.揭示酶的催化作用机理可用于优化萃取条件.以大豆分离蛋白为底物,研究了AS1.398在AOT/异辛烷反胶束体系中的反应机理.由于底物分子在反胶束中呈泊松分布,通过计算底物和酶分子数比例,推算出酶催化为单底物反应的概率占绝对优势.借鉴水相酶反应模型,考虑反胶束中分子交换作用,提出了反胶束中酶的单底物分子反应的作用模型,模型推导出水相的米氏常数比反胶束相的大1个数量级.实验测定酶在水相和反胶束相的米氏常数分别为3.2×10-3g·ml-1和4.2×10-4g·ml-1.两者比值与模型推导出的关系较吻合,表明此模型可用来表示反胶束中AS1.398的催化反应.