毒性蛋白表达及其工程菌选用的实验研究

摘要

目的了解人B淋巴细胞表面标志物CD19与6XHis/pRSET细菌表达载体重组的基因在不同BL21工程菌中转染的情况,及转染后在固体筛选培养基上菌落的生长情况.筛选其合适转染、表达的工程菌,为高表达和纯化CD19基因表达产物创造条件.方法将CD19基因的850bp片段和全长基因1 600bp分别在EcoRI位点与pRSET原核表达质粒重组后,转染BL21Star(DE3)与BL21Star(DE3)pLysS工程菌,在LB抗生素筛选培养基上观察菌落生长情况[1、2] .结果实验发现CD19的850bp基因片段在BL21工程菌中表现毒性较大,在转染于BL21Star(DE3)工程菌后,基本无菌落生长;而BL21Star(DE3)pLysS工程菌对CD19/pRSET重组基因表达的6XHis-CD19融合蛋白有较强的抗毒性,菌落生长旺盛且密度大.结论 BL21Star(DE3)pLysS工程菌比较适合用于毒性蛋白表达.