利用分子信标检测microRNA并成像肺癌干细胞的实验研究

摘要

目的 利用miR-155分子信标(MB)检测CD133+CD326+肺癌干细胞(LCSCs)中高表达的miR-155并成像肺癌干细胞.方法 采用对A549细胞逆向诱导及紫杉醇富集的方法,通过流式细胞仪从A549细胞中分选出CD133+ CD326+细胞,并对其干性进行鉴定.以壳聚糖纳米(CS)作为载体转染miR-155MB,激光共聚焦显微镜检测miR-155 MB对LCSCs中miR-155的识别功能并成像,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证.结果 分选的CD133+ CD326+细胞在干细胞培养基中成球生长,干性相关基因CD133、CD326、OCT-4、Nanog表达为A549细胞的3.27、3.39、6.01、3.42倍(P＜0.05),在细胞数为1×104数量下仍具备成瘤能力.CS转染miR-155 MB后在A549及LCSCs中均可看到较强的红色荧光,以LCSCs中荧光信号最强(P＜0.05),且荧光信号强弱趋势与qRT-PCR检测的miR-155的表达趋势较一致.结论 利用miR-155 MB能够检测LCSCs中高表达的miR-155并使其成像,为监测并发现肺癌干细胞提供新思路.