淫羊藿苷对脑星形胶质细胞缺氧/复氧损伤的保护作用研究

摘要

目的探讨淫羊藿苷对星形胶质细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用。方法利用CCK-8法测定7种不同浓度的淫羊藿苷培养液对正常培养星形胶质细胞24 h细胞活力的影响,筛选出安全浓度范围。将星形胶质细胞分为对照组、H/R组和淫羊藿苷组。H/R组和淫羊藿苷组采用无血清缺氧缺糖后恢复血清复氧复糖培养的方法构建H/R星形胶质细胞模型,淫羊藿苷组在此基础上使用安全浓度的淫羊藿苷进行干预。CCK-8法测定各组细胞活力,筛选出淫羊藿苷最佳有效浓度。检测各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧阴离子自由基(·O_(2)^(-))及超氧化物歧化酶(SOD)水平,H2DCFDA荧光探针检测各组细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1荧光探针测定各组细胞线粒体膜电位水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果7种浓度淫羊藿苷组中,3.8、7.5、15.0μmol/L淫羊藿苷组与对照组细胞活力比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,H/R组细胞活力降低(P<0.05);与H/R组比较,3.8、7.5、15.0μmol/L淫羊藿苷组细胞活力增强(P<0.05),且呈现剂量依赖的趋势,确定15.0μmol/L为淫羊藿苷最佳有效浓度。与对照组比较,H/R组LDH、·O_(2)^(-)、细胞内ROS水平明显增加,SOD活性减弱,线粒体膜电位下降,细胞凋亡数目增多(P<0.05)。与H/R组比较,淫羊藿苷组LDH、·O_(2)^(-)、细胞内ROS水平明显减少,SOD活性增强,线粒体膜电位上升,细胞凋亡数目减少(P<0.05)。结论淫羊藿苷可减轻H/R引起的星形胶质细胞损伤和细胞氧化应激反应,减少细胞凋亡。