UPLC-MS/MS测定大鼠血浆多柔比星浓度方法的建立及毒代动力学应用

摘要

目的建立一种简便、快速、灵敏的测定大鼠多柔比星血药浓度的超高效液相-质谱联用(UPLC-MS/MS)法,并将其应用于注射用盐酸多柔比星大鼠体内毒代动力学实验。方法采用ACQUITY UPLC?BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸(含2 mmol/L甲酸铵)水溶液-乙腈,梯度洗脱。体积流量为0.4 m L/min,进样量为10μL。采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)方式扫描,以正离子方式进行检测,蛋白沉淀法提取样品。用于定量分析的离子对分别为多柔比星m/z 544.43→m/z 397.08,内标地西泮m/z 285.02→154.40。SD大鼠30只,按体质量随机分为3组,分别单次iv 52.2、61.4、72.3 mg/m2盐酸多柔比星后测定血药浓度,并用DAS 3.1.4软件计算毒代参数。结果血浆中内源性物质不干扰待测物和内标的测定,多柔比星在0.5~100 ng/m L范围内线性关系良好,定量下限为0.5 ng/m L。多柔比星在0.5、1、20、80 ng/m L 4个浓度的批内批间精密度RSD值为3.21%~12.79%。多柔比星在1、80 ng/m L的提取回收率和基质效应分别为102.00%~103.75%和79.27%~89.34%。SD大鼠分别单次iv给予注射用盐酸多柔比星52.2、61.4、72.3 mg/m2后,多柔比星在大鼠体内的AUC0-t分别为(2318.78±282.65)、(3203.11±829.41)和(3326.96±546.04)ng·h/m L,C0.083h分别为(1720.50±851.19)、(3363.00±1458.84)和(2156.50±919.90)ng/m L。结论建立的UPLC-MS/MS分析方法灵敏度高、样品处理方法简单、样品分析时间短,可以应用于大鼠多柔比星毒代动力学试验中。