抗蛋白酶3抗体检测及影响因素的研究

摘要

目的研究血清样本稀释度、封闭液、孵育条件、洗涤条件及酶标板包被后保存时间对血清抗蛋白酶3(PR3)抗体检测结果的影响.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对159份血清进行抗PR3抗体检测,并用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析确定阳性界限(cut-off)值.结果血清样本最佳稀释度为1:50;5%脱脂奶粉封闭酶标板能有效地降低本底值;孵育缓冲液中加入牛血清白蛋白及脱脂奶粉比单用磷酸盐缓冲液(PBS)对测定值有明显影响.经ROC曲线分析实验的阳性临界值为正常阴性对照吸光度(A)值的2.5倍,灵敏度和特异性分别为84.62%和98.46%.结论血清抗PR3检测结果受血清样品稀释、封闭液、孵育条件及阳性临界值的选择等多因素的影响.