牦牛副伤寒沙门氏菌特异性抗原基因在大肠杆菌中的克隆及表达

摘要

对牦牛副伤寒牛病沙门氏菌（S. morbificans bovis）的染色体DNA进行提取,用基因工程中的“鸟枪法”,将限制性内切酶部分酶切染色体DNA片段,重组到载体pBR₃₂₂的Barn H I酶切位点上,再转化到大肠杆菌DH_5α中,经耐药表型筛选,在约1900个转化菌中找出了86个具有重组质粒的细菌株,经ELISA法检测,其中pS9,pS31表现出较强的表达,通过动物免疫试验,小鼠获5/8保护,豚鼠获6/8保护,大肠杆菌DH_5α无保护力（0/4,0/8）,证明本试验所克隆的片段是保护性抗原,为今后构建基因工程苗提供了依据。