基于地方分离B型诺维氏梭菌的产毒试验及羊羔疫菌苗的研制

摘要

以分离自青海省海晏县病死羊脏内的一株B型诺维氏梭菌株为研究对象,通过不同培养基、不同pH及不同培养时间等进行产毒比较试验证明,该菌在含1.0％葡萄糖培养基,pH 8.0 ～8.4,37℃培养72h产毒达最高点,平均可达2万MLD/mL,最高可达4万MLD/mL;利用该菌株制成羊黑疫单价疫苗,并以标准菌株菌苗作为对照,完成了家兔免疫攻毒、血清抗体测定;羊免疫血清抗体测定及高免血清的制备等试验.试验结果表明,该疫苗0.1mL免疫家兔21d,可抵抗200MLD(家兔最小致死量)毒素的攻击,是现用疫苗的2倍,0.1mL家兔免疫血清可中和300MLD(小白鼠最小致死量)的毒素,是现用疫苗的3倍,羊免疫14d,血清0.1mL可中和400 MLD(小白鼠最小致死量)的毒素,180d时血清0.1mL可中和50MLD的毒素,用此疫苗免疫家兔制备的抗血清每mL可中和160000MLD毒素.该菌株在筛选的培养基上具有良好的产毒性能,制备的羊黑疫疫苗免疫效果明显优于标准菌株菌苗,可作为羊黑疫疫苗生产用菌株.