咪唑啉受体候选蛋白（IRAS）剪接体的确证与功能研究

摘要

咪唑啉受体（Imidazoline Receptor，IR）是一种新型受体，I1R亚型在体内具有重要的生理作用，如血压调节，胰岛素分泌等，其内源性配体胍丁胺在阿片依赖中的作用也逐渐受到重视。Piletz通过两种IR蛋白抗血清从人脑海马cDNA文库中克隆了5131bp的新基因（GenBank：AF082516），将其命名为眯唑啉受体候选蛋白（IRAS）。HumanIRAS与I1R具有相同的选择性配体IRAS mRNA组织分布及蛋白分布与I1R一致，越来越多的证据表明IRAS就是I1R。针对human IRAS的N端制备了小鼠单克隆抗体。通过对多种不同来源细胞系进行分析，通过Western blot方法，发现在PCI2细胞上，IRAS抗体可以特异性识别50—60KD大小蛋白，随后钓取并克隆了该基因Ratiso—Iras，编码472个氨基酸。Ratiso—Iras的克隆提示可能在人也存在相同的IRAS的剪接体。通过对Ratiso—Iras的研究，分析Rat iso—Iras与human IRAS在分布与功能的方面的差异，可以更好的阐明human IRAS的特点。目前研究已从大鼠心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、脑组织均检测到Ratiso—Iras的表达，细胞定位研究表明Ratiso—Iras主要弥散分布于胞浆，human IRAS分布于胞浆并呈点簇状分布，提示两者可能存在亚细胞定位的不同，提示功能存在差别。