磷酯酶C对人血小板细胞质游离钙离子浓度的影响

摘要

目的测定磷酯酶C(phospholipase C, 简称PLC,下同)对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制.方法将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura-2/AM进行负载,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理荧光负载后的血小板,采用双波长荧光分光光度法分别测定经过不同处理后的血小板在静息状态和以ADP为诱导剂时的激活状态下的胞质游离钙离子浓度[Ca2+]i.结果以健康成人血为样品时,经生理盐水、ASA 334 μ mol*L-1 、2.5、3.75、5、10和20 U PLC*ml-1处理后的血小板,在静息状态下测得的胞质游离[Ca2+]i浓度( nmol * L-1 )分别为152.55±15.07, 131.63±15.58, 140.27±12.03, 139.48±1.73, 121.11±9.58, 116.62±15.96和107.20±17.07, 而以ADP为诱导剂激活血小板后测得的胞质游离[Ca2+]i(nmol * L-1 )分别为902.62±94.74, 687.99±62.86, 810.99±72.37, 701.73±21.37, 429.67±71.59, 342.82±44.86和263.27±25.46.以生理盐水作为对照,ASA 334 μmol * L-1、2.5、3.75、5、10和20 U PLC*ml-1剂量组对激活状态下血小板胞质[Ca2+]i的抑制率I(%)分别为25.83, 10.58, 25.04, 58.86, 69.84, 79.19.以5例高血压病人的血液为样品时,同样条件下,测得10 U PLC*ml-1对5例高血压病人血小板激活状态下胞质[Ca2+]i的抑制率IR(%)分别为74.25, 73.48, 61.32, 82.87, 70.60.结论无论是健康成人,还是高血压病人,PLC对静息状态下的血小板胞质[Ca2+]i均具有明显的影响(P<0.05),且对ADP激活后的血小板胞质游离[Ca2+]i的升高均具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性,表明PLC具有抑制血小板内钙释放作用.这可能是PLC抗血小板聚集作用的重要原因之一.