BPEI／miRNA、PAMAM／miRNA和PEI／miRNA治疗前列腺癌作用研究

摘要

目的利用分枝状聚乙烯亚胺(BPEI)、树枝状聚合物聚酰胺-胺(PAMAM)和线型的聚乙烯亚胺(LPEI)包载具有抑制前列腺癌细胞LNCa P增殖、侵袭和转移的miRNA-15a和miRNA-16-1构建3种聚阳离子纳米复合物,对其抑制LNCa P细胞作用进行考察。方法利用粒径分析仪测定3种纳米复合物的粒径Zeta电位,利用凝胶电泳实验测定载体材料包裹miRNA的稳定性;利用荧光显微镜和流式细胞仪考察3种复合物对LNCa P细胞的转染效率;CCK8法测定抑制LNCa P细胞增殖效果;Western blot法测定BCL-2、Cyclin D1和Wnt3a蛋白表达效果。结果分枝状聚乙烯亚胺,树枝状聚合物聚酰胺-胺和线型的聚乙烯亚胺3种材料包裹miRNA可形成稳定的纳米复合物,在N/P=5时,分枝状聚乙烯亚胺/miRNA-CY3对LNCa P的转染效率高于树枝状聚合物聚酰胺-胺/miRNA-CY3和线型的聚乙烯亚胺/miRNA-CY3,具有统计学意义(P<0.01)。分枝状聚乙烯亚胺、树枝状聚合物聚酰胺-胺和线型的聚乙烯亚胺都可以携带miRNA-15a和miRNA-16-1进入LNCa P细胞,并且阻滞LNCa P细胞中BCL-2、Cyclin D1和Wnt3a蛋白的表达。结论分枝状聚乙烯亚胺、树枝状聚合物聚酰胺-胺和线型的聚乙烯亚胺3种材料包裹miRNA-15a和miRNA-16-1可形成稳定,并且对前列腺癌细胞LNCa P细胞具有高转染效率的纳米系统。并可以有效阻滞LNCa P细胞中BCL-2、CCDN1和Wnt3a蛋白的表达,有望成为治疗前列腺癌的基因给药系统。