分心木提取物对大鼠肝缺血-再灌注损伤的防护作用及机制

摘要

目的探讨分心木体积分数40%乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位(DJFE)对大鼠肝缺血-再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)的防护作用及机制。方法将32只大鼠随机分为对照组、模型组、DJFE低、高剂量组(62.5、125 mg·kg^(-1)),每组各8只。分心木组给予相应DJFE溶液,其余两组给予等体积的生理盐水,采用夹闭肝脏的左外侧叶、中叶的静脉和门静脉90 min、再灌注24 h的方法建立HIRI模型。建模后进行取血,取肝脏。对大鼠肝脏组织进行HE染色,观察肝脏组织的病理学变化。生化试剂盒检测肝功能指标[谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)]和氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、黄嘌呤氧化酶(XOD)]的水平。qPCR法检测肝脏组织中NF-κBp65和TGF-β1 mRNA的表达水平。Western blot法检测各组大鼠肝脏组织中NF-κB p65和TGF-β1蛋白的表达水平。结果HE染色及生化指标测定结果表明与模型组相比较,分心木组能够明显减轻HIRI后的肝脏组织损伤、明显降低血清中AST和ALT的水平、明显降低肝脏组织中XOD、MDA的水平、明显提升SOD和GSH-PX的活性。运用Western blot法和qPCR法对肝脏组织中的NF-κBp65、TGF-β1因子的蛋白与mRNA表达水平进行测定,发现HIRI后NF-κBp65、TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平均上调,而DJFE对两者均显示出一定程度的抑制作用。结论DJFE可通过减少氧自由基产生和降低体内脂质氧化程度;抑制NF-κBp65和TGF-β1的表达,减轻炎症反应,从而起到保护肝脏的功效。