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四环素调控TRAIL基因表达对人白血病细胞系Jurkat生物学特性的影响

         

摘要

本实验将人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF—related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因的cDNA片段导入四环素基因调控系统RevTet—On。病毒感染人白血病细胞Jurkat后,建立了四环素调控TRAIL基因表达细胞系Jurkat—RevTet—On-TRE-TRAI(Jurkat3T)和对照细胞系Jurkat—RevTet—On-TRE(Jurkat2T)。通过强力霉素(Dox)诱导TRAIL基因的表达,Western印迹检测到TRAIL蛋白的表达;细胞计数证明了TRAIL的杀伤作用;通过流式细胞术检测到了TRAIL的凋亡诱导作用,生物物理学检测表明TRAIL表达使细胞渗透脆性增大,最大变形能力下降。结果表明TRAIL基因的表达能够促进肿瘤细胞Jurkat的凋亡并引起了Jurkat细胞生物学特性的改变。

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