一种莱姆病螺旋体real-time PCR方法的建立及其在鼠标本检测中的应用评价

摘要

目的 基于莱姆病螺旋体recA基因,建立一种检测鼠中莱姆病螺旋体的real-time PCR方法.方法 通过GenBank分析比较莱姆病螺旋体recA基因,选择其保守序列设计MGB探针及引物并进行方法学评估.并应用建立的real-timePCR方法和nested PCR方法对收集的123份鼠标本进行检测分析.结果 本研究建立的real-time PCR方法仅对莱姆病螺旋体检测阳性,其最小检出浓度为101 copies/μL.标准曲线各浓度点Ct值批内、批间平均变异系数(CV)分别为1.56％和2.30％.123份鼠标本中,real-time PCR检测59例阳性,nested PCR检测43例阳性.结论 新建立的real-time PCR方法具有快速、敏感和特异的优点,可用于鼠标本中莱姆病螺旋体的检测.