肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用

摘要

目的 为建立肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)的DPO-PCR快速检测方法.方法 本研究以EIEC ipaH基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸(DPO)引物,建立了EIEC DPO-PCR检测方法.结果 退火温度范围在47℃～67℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与EIEC的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.17×102 cfu/mL.利用该检测方法对采集的230份样品进行检测,共计检出3份EIEC阳性样品,与国标法(GB 4789.6-2003)检测结果一致,显示了良好的实用性.结论 该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性.