成华猪γ-干扰素基因分子克隆与序列分析

摘要

为研究猪γ-干扰素在抗御传染性疾病和肿瘤生物治疗中的免疫增强作用,本实验以ConA刺激成华猪外周血淋巴细胞提取激活淋细胞的mRNA,设计合成特异的引物序列,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增和克隆成华猪IFN-γ基因并进行序列测定.成华猪IFN-γcDNA约长500bp,从第68位核苷酸开始编码其信号肽,到569位核苷酸为终止子.IFN-γ基因的开放框架(ORF)由498bp构成,编码166个氨基酸.成华猪IFN-γ与猪IFN-γ基因核苷酸间同源性为98%,在261～269存在点突变,在氨基酸水平完全一致.IFN-γ氨基酸与鼠同源性为30%,与人同源性为40%.