副流感病毒5型荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要

为建立检测副流感病毒5型(PIV5)的荧光定量RT-PCR方法,针对PIV5 L基因设计筛选出一对特异性引物和探针,对退火温度、引物浓度、探针浓度进行了优化,并进行了敏感性、特异性和重复性试验.结果显示:最适退火温度为54.7°C,最适引物浓度为0.5 μmol/L,最适探针浓度为0.1 μmol/L.检测灵敏度为10 copies、0.8 TCID50,特异性结果显示与BPIV3等22种常见病毒及原辅材料均无交叉,重复性试验显示不同模板浓度重复检测变异系数均小于1.5％,重复性良好.