可溶性血管内皮生长因子受体抑制膀胱癌T24细胞生长的研究

摘要

目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体sKDR对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法RT-PCR方法提取KDR胞外血管内皮生长因子（VEGF）结合区编码基因,构建真核分泌型表达质粒pCI-KDR,脂质体法转染至T24细胞,经G418抗性压力筛选稳定转染细胞株。ELISA法检测细胞培养上清VEGF结合活性,筛选稳定表达sKDR的T24细胞株,RT-PCR检测细胞KDR基因表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法测定sKDR对T24细胞及人脐静脉内皮细胞（HUVEC）生长增殖的影响,流式细胞仪观察细胞周期及凋亡情况。结果稳定表达sKDR的T24细胞KDR mRNA表达水平（0.665±0.048）明显高于空质粒对照组（0.160±0.015）（P＜0.0001）,细胞增殖水平下降了55.1%（P＜0.0001）,其细胞培养上清抑制HUVEC增殖的能力提高了41.6%（P＜0.0001）,出现了明显的GO/G1期阻滞（P=0.0078）和细胞凋亡（凋亡率12.7%）。结论靶向KDR的sKDR通过干扰VEGF/KDR的信号传导通路可抑制膀胱癌T24细胞及HUVEC在体外的生长速度,KDR有可能成为新的膀胱癌抗血管生成治疗靶点。