类固醇生成因子-1基因沉默对人肾上腺皮质腺癌H295R细胞的作用及其临床意义

摘要

目的研究类固醇生成因子-1（SF-1）基因下调对人肾上腺皮质腺癌H295R细胞的影响,并探讨SF-1在肾上腺肿瘤发病中的作用。方法用含SF-1特异性短发夹（shRNA）序列的质粒载体pGenesil1-SF-1-shRNA及含非特异性序列的阴性对照质粒pGenesil1-negative-shRNA分别转染H295R细胞。48 h后用蛋白质印迹法和荧光定量PCR检测SF-1表达水平。WST-1法及细胞计数法检测转染后细胞增殖情况,免疫组化SABC法检测转染后各细胞组中Ki-67表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果 SF-1-shRNA有效地抑制了SF-1的表达,在蛋白水平和mRNA水平的抑制率分别为69.07%和71.02%（P＜0.01）。WST-1及细胞计数法均显示SF-1基因沉默组细胞增殖缓慢,增殖明显受到抑制（P＜0.01）;而TUNEL结果恰好相反,荧光镜下SF-1基因沉默组凋亡细胞的数目及形态均比较明显,凋亡细胞数约为阴性对照组的3.7倍（P＜0.01）;SF-1基因干扰后,其Ki-67阳性细胞率要低于阴性对照组细胞,分别为（16.90±2.17）%和（33.48±3.16）%（P＜0.01）。结论 SF-1基因沉默可抑制肾上腺皮质腺癌细胞增殖,有望成为研究肾上腺肿瘤发病机制及其治疗的重要分子。