siRNA敲减整合素连接激酶影响人阴茎海绵体平滑肌细胞功能的体外研究

摘要

目的探讨整合素连接激酶（ILK）基因对人海绵体平滑肌细胞收缩和舒张功能的影响。方法人海绵体平滑肌细胞为实验对象,分为非沉默组、非处理对照组和ILK小干扰RNA（siRNA）实验组,采用siRNA干扰技术下调细胞中ILK的表达,伸展实验和基质胶黏附实验分别检测ILK基因敲减前后海绵体平滑肌细胞伸展和黏附能力变化,Transwell小室观察ILK表达对海绵体平滑肌细胞迁移能力的影响,荧光标记的鬼笔环肽染色海绵体平滑肌细胞观察ILK基因敲减前后细胞骨架的变化。结果黏附实验中,非沉默siRNA组、非处理对照组和实验组siRNA干扰的平滑肌细胞吸光度（A）值分别为0.184±0.034、0.179±0.028和0.092±0.010;迁移实验中,3组穿过Matrigel胶包被的Transwell小室的平滑肌细胞A值分别为0.184±0.017、0.188±0.013和0.106±0.003,实验组与非沉默siRNA组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;非处理对照组平滑肌细胞应力纤维错综分布于细胞周边与胞质内,而实验组的细胞应力纤维仅分布于细胞边缘。结论 ILK下调降低人海绵体平滑肌细胞的黏附、伸展、迁移能力,并通过影响细胞骨架重构参与调节平滑肌收缩与舒张状态,提示ILK基因有可能成为勃起功能障碍基因治疗的有效靶点。